2.1金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物置于TSA上或TSB中，30-35℃，培養(yǎng)18-24h。

2.2生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物置于FTM中，30-35℃，培養(yǎng)18-24h。

2.3白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物置于SDA上，20-25℃，培養(yǎng)2-3天。

2.4黑曲霉菌的新鮮培養(yǎng)物置于SDA上，20-25℃，培養(yǎng)5-7天，或直到活的豐富的孢子，用0.05%聚山梨酯的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉將孢子洗脫，然后，吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用0.05%聚山梨酯的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉制成適宜濃度的菌懸液。

2.5菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用；若保存在2～8℃，可在24小時(shí)內(nèi)使用。生孢梭菌孢子懸液可替代新鮮的菌懸液，孢子懸液可保存在2～8℃，在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使用。

為確認(rèn)試驗(yàn)條件是否符合要求，應(yīng)進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)，陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長(zhǎng)。如陰性對(duì)照有菌生長(zhǎng)，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。