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微生物大小的測定

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-09-18  來源:實驗室資訊網(wǎng)
核心提示:一、基本原理  微生物細胞大小,是微生物的形態(tài)特征之一,也是分類鑒定的依據(jù)之一。由于菌體很小,只能在顯微鏡下測量。用來測
 一、基本原理
  微生物細胞大小,是微生物的形態(tài)特征之一,也是分類鑒定的依據(jù)之一。由于菌體很小,只能在顯微鏡下測量。用來測量微生物細胞大小的工具有目鏡測微尺(圖Ⅳ-4)和鏡臺測微尺(圖Ⅳ-5)。
  鏡臺測微尺(圖Ⅳ-5)是中央部分刻有精確等分線的載玻片。一般將1mm等分為100格(或2mm等分為200格),每格長度等于0.01mm(即106μm)。是專用于校正目鏡測微尺每格長度的。
  目鏡測微尺(圖Ⅳ-4,A)是一塊可放在接目鏡內(nèi)的隔板上的圓形小玻片,其中央刻有精確的刻度,有等分50小格或100小格兩種,每5小格間有一長線相隔。由于所用接目鏡放大倍數(shù)和接物鏡放大倍數(shù)的不同,目鏡測微尺每小格所代表的實際長度也就不同,因此,目鏡測微尺不能直接用來測量微生物的大小,在使用前必須用鏡臺測微尺進行校正,以求得在一定放大倍數(shù)的接目鏡和接物鏡下該目鏡測微尺每小格的相對值,然后才可用來測量微生物的大小。
二、器材
  枯草芽孢桿菌染色玻片標本,目鏡測微尺,鏡臺測微尺,顯微鏡,擦鏡紙,香柏油等。
三、操作步驟
  1.目鏡測微尺的標定
  (1)放置目鏡測微尺取出接目鏡,旋開接目鏡透鏡,將目鏡測微尺的刻度朝下放在接目鏡筒內(nèi)的隔板上(圖Ⅳ-4,B),然后旋上接目透鏡,最后將此接目鏡插入鏡筒內(nèi)(圖Ⅳ-4,C)。
  (2)放置鏡臺測微尺將鏡臺測微尺置于顯微鏡的載物臺上,使刻度面朝上。
  (3)校正目鏡測微尺先用低倍鏡觀察,對準焦距,當看清鏡臺測微尺后,轉(zhuǎn)動接目鏡,使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度平行,移動推動器,使目鏡測微尺和鏡臺測微尺的某一區(qū)間的兩對刻度線完全重合,然后計數(shù)出兩對重合線之間各自所占的格數(shù)(圖Ⅳ-6)。
  根據(jù)計數(shù)得到的目鏡測微尺和鏡臺測微尺重合線之間各自所占的格數(shù),通過如下公式換算出目鏡測微尺每小格所代表的實際長度。
  目鏡測微尺每小格長度(μm)=
  同法校正在高倍鏡和油鏡下目鏡測微尺每小格所代表的長度。
  2.菌體大小的測定
  目鏡測微尺校正后,移去鏡臺測微尺,換上枯草芽孢桿菌染色玻片標本,校正焦距使菌體清晰,轉(zhuǎn)動目鏡測微尺(或轉(zhuǎn)動染色標本),測出枯草芽孢桿菌的長和寬各占幾小格,將測得的格數(shù)乘以目鏡測微尺每小格所代表的長度,即可換算出此單個菌體的大小值,在同一涂片上需測定10至20個菌體,求出其平均值,才能代表該菌的大小。而且一般是用對數(shù)生長期的菌體來進行測定。
  3.取出目鏡測微尺,將接目鏡放回鏡筒,再將目鏡測微尺和鏡臺測微尺分別用擦鏡紙擦拭后,放回盒內(nèi)保存。
四、實驗報告
(1)將目鏡測微尺校正結(jié)果填入下表。
(2)在高倍鏡下測量枯草芽孢桿菌大小結(jié)果填入下表。
 
 
編輯:songjiajie2010

 
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