成分：
　　磷酸氫二鉀　　5g
　　多胨　　　　　7g
　　葡萄糖　　　　　5g
　　蒸餾水　　　　　1000mL
　　pH7.0
制法：溶化后校正pH，分裝試管，每管1mL，121℃高壓滅菌15min。
甲基紅(MR)試驗：自瓊脂斜面挑取少量培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于36±1℃培養(yǎng)2～5d，哈夫尼亞菌則應(yīng)在22～25℃培養(yǎng)。滴加甲基紅試劑一滴，立即觀察結(jié)果。鮮紅色為陽性，黃色為陰性。甲基紅試劑配法：10mg甲基紅溶于30mL95%乙醇中，然后加入20mL蒸餾水。
V－P試驗：用瓊脂培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于36±1℃培養(yǎng)2～4d。哈夫尼亞菌則應(yīng)在22～25℃培養(yǎng)。加入6%α－萘酚－乙醇溶液0.5mL和40%氫氧化鉀溶液0.2mL，充分振搖試管，觀察結(jié)果。陽性反應(yīng)立刻或于數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)紅色，如為陰性，應(yīng)放在36±1℃下培養(yǎng)4h再進行觀察。