指在微生物實驗工作中，控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施。

（二）無菌環(huán)境

無菌室

無菌柜

超凈工作臺

1、無菌室

（1）無菌室的結(jié)構(gòu)：更衣間、緩沖間、操作間

（2）無菌室的消毒和防污染

每日（使用前）紫外線照射（1~2小時）.

每周用甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸（2小時）.

每月用新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒。

2、超凈工作臺

超凈臺的使用與保養(yǎng):

（1）風速保持在0.32-0.48米/秒;

（2）使用前開啟紫外燈照射30分鐘以上;

（3）讓超凈臺預工作10~15分鐘;

（4）使用完畢后，用70%酒精將臺面和臺內(nèi)四周擦拭干凈.

（三）無菌器材

滅菌器材：玻璃器皿、培養(yǎng)基、無菌衣等.

消毒器材：無菌室內(nèi)的凳子、試管架、天平、工作臺、手等

（四）無菌操作

1、目的：

（1）是保證待檢物品不被環(huán)境中微生物的污染；

（2）是防止被檢微生物在操作中污染環(huán)境或感染操作人員。

2、進入無菌室前的準備

（1）定期檢查無菌環(huán)境的空氣是否符合規(guī)定；

（2）用紫外線滅菌處理30~60分鐘；

（3）檢查無菌器材是否完備；

（4）洗手消毒；

（5）手部消毒后，再穿戴無菌工作服。

3、檢驗操作過程的無菌操作要求

（1）在操作中不應有大幅度或快速的動作；

（2）使用玻璃器皿應輕取輕放。

（3）在正火焰上方操作；

（4）接種用具在使用前、后都必須灼燒滅菌；

（5）在接種培養(yǎng)物時，協(xié)作應輕、準。

（6）不能用嘴直接吸吹吸管。

（7）帶有菌液的吸管、玻片等器材應及時置于盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒。

斜面接種時的無菌操作

(1)接種滅菌 (2)開啟棉塞 (3)管口滅菌 (4)挑起菌苔 (5)接種 (6)塞好塞子