中文字幕欧美一区二区_久久精品国产亚洲77777_91在线?清?看_狠狠干妹子_人妻夜夜爽爽88888视频_97综合网

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 
當前位置: 首頁 » 食品專題 » 生物實驗技術 » 細胞實驗技術 » 正文

常規的瓊脂糖凝膠電泳檢測細胞凋亡

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-08

方法一:

1.收集細胞(5×106)1000r/min,離心5min,去上清。
2.PBS洗一次,1000r/min,離心5min,去上清。
3.加細胞核裂解液500μl重懸細胞,50℃水浴,3~5h,不時振搖或37℃過夜。
4.加0.5ml平衡酚抽提,上下顛倒幾次混勻,6000r/min,離心5min。
5.上清移至另一Ep管,加0.5ml氯仿:異戊醇抽提,上下顛倒幾次混勻,6000r/min,離心5min。
6.上清移至另一Ep管,加50μl的3mol/L乙酸鈉和2ml預冷無水乙醇,上下顛倒幾次混勻,可見絮狀白色沉淀物。
7.置液氮5~10min,12 000r/min離心10min沉淀DNA,去上清,真空抽干或風扇下吹干殘存液體。
8.加50~100μl TE緩沖液,另加5μl RNase,37℃水浴30min。
9.取20μl加上樣緩沖液2~5μl,1%瓊脂糖凝膠電泳(電壓50V,1.5~2h),UV下觀察。


方法二:
1.離心收集細胞(5×106),PBS(無Ca2+和Mg2+)洗1~2次。
2.0.5ml TBE溶液重懸,37℃孵育30min。
3.1mg/ml蛋白酶K 37℃處理30min。
4.加入上樣緩沖液0.1ml。
5.25μl上樣,1.5%的瓊脂糖凝膠上電泳,2V/cm 6h。


方法三:
1.收集細胞懸液(106細胞),低速離心(1000r/min,離心5min)。
2.去上清,沉淀加0.4ml低滲緩沖液作用1h。
3.13 000r/min,離心10min,將上清轉移至另一Eppendorf管中,加等量50%異丙醇和0.5mol/L NaCl混勻,置液氮5min。
4.12 000r/min,離心10min,棄上清,沉淀真空抽干。
5.加TE 100μl,65℃加熱10min,取20μl,加1~2μl上樣緩沖液,電泳觀察。


方法四:
1. 收集細胞,1000r/min離心5min,去上清。
2.用冰預冷的70%乙醇固定,可長期保存于-20℃冰箱。
3.1000r/min離心5min,去除固定液,用約0.5ml的PBS重懸細胞。
4.轉入Eppendorf管中,同法離心,去上清。
5.細胞用40μl PC緩沖液重懸,室溫30~60min。
6.1000r/min離心5min,吸上清于新的Eppendorf管中,真空濃縮15min。
7.加入0.25% NP-40溶液3μl,1mg/ml RNase A溶液3μl,37℃,30min。
8.加入3μl蛋白酶K,37℃,30min。
9.加入12μl樣品稀釋液,含溴化乙錠的1.5%瓊脂糖電泳,觀察。

 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 5.874 second(s), 1378 queries, Memory 3.8 M
主站蜘蛛池模板: 久久精品人 | 955cc欧美在线播放 | 亚洲精品久久久中文字幕 | 视频亚洲区 | 男人插女人的免费视频 | 欧美人c交zoozooxx | 国产xxx视频 | 欧美性受ⅹ╳╳╳黑人a性爽 | 日韩一区二区在线观看视频 | h小视频在线 | 女人和拘做受全程看免费软件 | 97久久人人爽人人爽人人片 | 九九热免费在线观看 | 人人爽在线视频 | 国产一区二区在线在线 | 国产在线视频在线观看 | 天天草草草 | wwwxxx在线播放 | 中文国产三级 | 中日字幕大片在线播放 | 国产精品久久久久久久亚洲按摩 | 爱福利在线视频 | 中文字幕在线不卡播放 | 爱草视频| 无码纯肉视频在线观看喷水 | 女人被添全过程A片久久AV | 求个毛片网站 | 久久久久久久久毛片精品火炮 | 日韩成人区 | 亚洲精品无码国产 | 亚洲人成无码网站在线观看 | 成人片黄网站色大片免费毛片 | 一级做性色a爰片久久毛片免费 | 欧美精品二区 | 99久久国语露脸国产精品 | 国产福利男女XX00视频 | 久久精品国产精品国产精品污 | 天天夜操| 一道本一区二区三区 | 免费av无码无在线观看 | 欧美丰满熟妇性xxxx |