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初代組織塊培養(yǎng)法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

1. 剪切:把組織小塊置于小燒杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污,吸靜Hanks液,用眼科剪反復(fù)剪切1mm3塊為止。

2. 擺布:用彎頭吸管吸取若干小塊,置于培養(yǎng)瓶中,用吸管彎頭把組織小塊擺布在培養(yǎng)瓶底部,小塊相互距離以0.5cm為宜,每一25ml培養(yǎng)瓶底可擺布20~30塊。

3. 輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,另瓶底向上,注意翻瓶時(shí)勿另組織小塊流動(dòng),塞好瓶塞,置36.5℃溫箱培養(yǎng)2小時(shí)左右(勿超過4小時(shí)),使小塊微干涸。

4. 培養(yǎng):從微箱中取出培養(yǎng)瓶,開塞,46度斜持培養(yǎng)瓶,箱瓶底腳部輕輕注入培養(yǎng)液少許,然后緩緩再把培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn)過來,讓培養(yǎng)液慢慢覆蓋附于瓶地上的組織小塊。置溫箱中靜止培養(yǎng)。待細(xì)胞從組織塊游出數(shù)量增多后。再補(bǔ)加培養(yǎng)液。


 

 

 
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