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噬菌體肽庫技術(shù)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-28

  80年代中期,Georgep.s在前人對絲狀噬菌體分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)上首先提出了噬菌體展示技術(shù)。其基本原理是將外源DNA片段插入噬菌體編碼蛋白基因PⅢ或PⅥ中,使外源DNA片段對應(yīng)的表達產(chǎn)物融合在噬菌體的外殼蛋白中形成融合蛋白,呈現(xiàn)在噬菌體表面。該技術(shù)將蛋白質(zhì)分子的表型和基因型巧妙地結(jié)合于絲狀噬菌體這樣一個便于對其進行一系列生化和遺傳操作的載體上,從而大大簡化了蛋白質(zhì)分子表達文庫的篩選和鑒定。

  噬菌體肽庫是噬菌體展示技術(shù)的一個非常重要的分支。肽庫是由大量帶有不同肽段的單個噬菌體組成的重組噬菌體庫。通過目標受體來篩選與其相互作用的噬菌體肽,經(jīng)過洗脫、擴增,從而富集到特異性的重組噬菌體,并分析所篩選到的肽的結(jié)構(gòu)和序列,為蛋白質(zhì)分子之間(如抗原與抗體、受體與配體、酶與底物)的相互作用機理提供理論依據(jù)。隨著噬菌體肽庫技術(shù)應(yīng)用越來越廣,其技術(shù)也得到了充分發(fā)展。

  噬菌體肽庫的基本原理是將隨機肽段插入到噬菌體衣殼蛋白上形成融合蛋白而展示出來,并利用噬菌體能大量復(fù)制的特點,得到不同重組噬菌體的多拷貝,為不同的研究提供有利的工具。


  噬菌體肽庫技術(shù)應(yīng)用范圍很廣,可用于表位的確定、描述蛋白之間的作用、確定非蛋白配體的蛋白模擬表位、受體的活性作用分子篩選、酶底物的確立、分析DNA結(jié)合蛋白等,隨著生物技術(shù)的發(fā)展,其應(yīng)用領(lǐng)域也越來越廣。

 

 
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