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點樣法

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-06

點樣法在多聚物的設計方面與原位合成技術相似。只是合成工作用傳統的DNA、多肽合成儀或PCR擴增或體內克隆等方法完成。大量制備好的核酸探針、多肽、蛋白等生物大分子再用特殊的自動化微量點樣裝置將其以較高密度互不干擾地印點于經過特殊處理的玻片、尼龍膜、硝酸纖維素膜上,并使其與支持物牢固結合。支持物需預先經過特殊處理,例如多聚賴氨酸或氨基硅烷等。亦可用其它共價結合的方法將這些生物大分子牢牢地附著于支持物上。現在已經有比較成型的點樣裝置出售,例如美國Biodot公司的“噴印”儀以及Cartesian Technologies公司的Pix-Sys NQ/PA系列“打印”儀。這些自動化儀器依據所配備的“打印”或“噴印”針將生物大分子從多孔板吸出直接“打印”或“噴印”于芯片片基上。“打印”時針頭與芯片片基表面發生接觸而“噴印”時針頭與片基表面保持一定的距離[1]。所以,“打印”儀適宜制作較高密度的微陣列(例如2500點/cm2),“噴印”法由于“噴印”的斑點較大,所以只能形成較低密度的探針陣列,通常400點/cm2。點樣法制作芯片的工藝比較簡單便于掌握、分析設備易于獲取,適宜用戶按照自己的需要靈活機動地設計微點陣,用于科研和實踐工作。 目前,除了在生物芯片研制方面享有盛譽的Affymetrix公司等個別公司使用原位合成技術制造芯片外,大多中小型公司普遍采用點樣技術制作生物芯片。

 

 
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